蛋白质电泳的基本原理

蛋白质电泳的基本原理

电泳不但应用于蛋白质的分离与含量的测定，而且在免疫学实验中有许多新的应用。例如：诊断乙型肝炎的乙型肝炎抗原（HBAg)的电泳测定>诊断原发性肝癌的甲胎蛋白（AFP>的电泳测定等等。
将两个白金电极放在氯化钠溶液中，通上直流电，则两电极间形成一个恒定的电场。溶液中带正电荷的Na+向负极移动，带负电荷的cr向正极移动。结果在负极得到NaOH,在正极得到Cl2。这现象是大家熟悉的，叫做电解。胶体质点（如蛋白质分子）的表面也带有电荷。由于电荷的存在，通电时，胶体质点就能向电场一极移动。这种现象叫做电泳。事实上，不管离子也好，胶体质点也好，这种在电场的影响下移动的现象，在本质上是没有区别的，不过名称不同而已。

一般临床检验室对电泳的应用，主要还是蛋白质的检定。以下就谈谈蛋甶质电泳的原理。蛋白质是由氨基酸组成的，所以血淸中各种蛋白质都和氨基酸一样具有酸性基团(-COOH)，或硷性基团（-NH2)。
若溶液的PH值低于等电点，则这个蛋白质带生电荷，在电场中向负极移动。反之，溶液的PH值大于等电点，则这个蛋白质带负电荷，在电场中向正极移动。蛋白质两性离各种蛋白质都有它的等电点。人血浆蛋白质的等电点如表46。其等电点都低于PH7.5,所以在pH比它们等电点高的缓冲液中（PH8.6时），蛋白质带负电荷，在电场中向正极移动。

一蛋白质在电场中移动的速度，是和它本身所带的电量、电场的强度和运动中所受到的阻力有关。因此，在同一条件下各种蛋白质的移动速度不同。例如人血淸中各种蛋白质等电点不同，在同一PH溶液中移动速度不同，故电泳时能在电泳支持物（如滤纸或琼脂等）上区分出各个蛋白质。经染色后，得到鲜明的色带图谱。将各条色带剪下分别溶于脱色剂中，再进行比色测定，就能求出各种蛋白质占总蛋白量的百分率，这就是用电泳法分离和测定蛋白质的基本原理。