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聚丙烯酰胺凝胶电泳和醋酸纤维薄膜电泳简介

1617 人参与  2018年08月06日 11:08  分类 : 医药化学  评论

聚丙烯酰胺凝胶电泳和醋酸纤维薄膜电泳简介
一、聚丙烯酰胺凝胶电泳:由于被电泳的物质在圆柱形的支持物中电泳,形成不连续的圆盘形区带,因而亦称圆盘电泳。聚丙烯酰胺凝胶是一种人工合成的凝胶,是丙烯酰胺单体(ch2=chconh2>和交联剂甲叉双丙烯酰胺(ch2=chconhch2nhcoch=ch2)在催化剂的作用下聚合而成的一种凝胶。经聚合后的凝胶有一定的孔径大小,而且这孔径可以调节,以适应各种不同电泳物的需要。因此聚丙烯酰胺电泳有分子筛和电泳的双重作用,因而能将蛋白质较细地分离。如人血淸蛋白纸上电泳可分成5〜7个组分,聚丙烯酰胺凝胶电泳则可分成20〜30个组分。在操作过程中较其他电泳方法为复杂,目前一般的临床检验室使用尚少。但它具有高度的分辨能力,在医疗诊断上有一定的发展前途。
二、醋酸纤维薄膜电泳:醋酸纤维薄膜是醋酸纤维素溶于有机溶剂(如丙酮等),涂抹成均匀的薄膜。可作细菌滤膜,也可在电泳上作支持物。由于醋酸纤维薄膜对蛋白质吸附少,电泳没有“拖尾”现象,各区带分离清晰,而且能分离出在纸上不易分出的某些蛋白(如胎儿甲种球蛋白),电泳时间短等优点。在临床实验室里已用来作血清蛋白、脂蛋白、血红蛋白、同功酶等的分离。近年来国内已有各种规格的醋酸纤维薄膜成品可供采用,无须自行制备。因而在临床实验室中醋酸纤维薄膜电泳越来越多应用。
三、琼脂凝胶电泳即以琼脂凝胶作为支持物进行电泳。因琼脂凝胶中含有大董水分,对蛋白质的吸附极微,几乎无“拖尾”现象。电泳图谱区带整齐,界限清楚,重复性好,而且是透明的,可制成有弹性的干膜供长期保存。琼脂凝胶甩作免疫电泳,进鉴别用其它方法所不能鉴别的复杂生物活性体系。故检验室除了用作血淸蛋白和脂蛋白电泳外,常用作对流免疫电泳,为某些诊断作常规检査,这是由于它有快速、简易等优点。

四、纸上电泳:是临床检验室最常用的方法。一般用作血淸蛋电泳、血红蛋白电泳和脂蛋白电泳等。

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